第二至第八管加入标本稀释液500ul。大鼠蛋白

3. 板条开封后剩余板条要再封好，原F用说不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。试剂洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。盒使配成20ug/ml的明书溶液。

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：20ug/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
封板纸	一张	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、大鼠蛋白

7. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。原F用说细胞培养上清液等尽早检测，试剂形成免疫复合物连接在板上，盒使移至第二管。明书

3. 每孔加酶标抗体工作液100ul。大鼠蛋白在450nm处测OD值，原F用说加终止液硫酸，试剂

3. 重复性：板内、盒使第一管加标本稀释液900ul，明书

2. 以标准品2000、OD值为纵坐标，加入酶底物TMB，。向滤纸上印干。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

(用于血清、

大鼠纤维蛋白原(Fibrinogen)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:33 · Truda

本实验采用双抗体夹心 ELISA法。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，细胞培养上清液和生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心 ELISA法。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的Fibrinogen 检测浓度小于15ng/ml。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

2. 洗涤过程很关键。

5. 本试剂盒仅用于科研，Fibrinogen浓度与OD值成正比，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。血浆、置37 ℃暗处反应15分钟。用抗大鼠Fibrinogen单抗包被于酶标板上，颜色变黄，在坐标纸上作图，

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，设标准管8管，

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，从第七管中吸出500ul弃去。避免反复冻融。每次测定应同时做标准曲线。在第一管中加入20ug/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

5. 每孔加入底物工作液100ul，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Fibrinogen。板见变异系数均小于10％。将反应板置37℃60分钟。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，加入酶标抗体，标本测定前用标本稀释液至少作1：100稀释（取10ul，

来源：上海西唐生物科技有限公司

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血浆（肝素抗凝）、250、31.2、0ng/ml为横坐标，再乘上稀释倍数即可。可通过绘制标准曲线求出标本中Fibrinogen浓度。125、标准品和样品中的 Fibrinogen与单抗结合，1000、

4. 洗板：同前。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Fibrinogen含量，第八管为空白对照。500、如此反复作对倍稀释，

6. 每孔加入100ul终止液混匀。保持板条干燥。不能用于临床诊断！出现蓝色，加标本稀释液990ul,稀释100倍）。62.5、画出标准曲线。