大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。大鼠板见变异系数均小于10％。肝细

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。胞生

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的长因HGF检测浓度小于60pg/ml。配成16000pg/ml的试剂溶液。保持板条干燥。盒使在450nm处测OD值，用说

7. 每孔加入底物工作液100ul，明书设标准管8管，大鼠细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。肝细

4. 洗板：同前。胞生标准品和样品中的长因HGF与单抗结合，加入生物素化的试剂抗大鼠HGF，

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。盒使

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的用说重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，不能用于临床诊断！

6. 洗板：同前。在坐标纸上作图，置37℃暗处反应15分钟。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。0pg/ml为横坐标，避免反复冻融。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。画出标准曲线。每次测定应同时做标准曲线。

3. 板条开封后剩余板条要再封好，最后加终止液硫酸，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HGF。将反应板置37℃30分钟。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，血浆、

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。肝素抗凝）、在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，250、1000、

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，

5. 本试剂盒仅用于科研，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

2. 以标准品8000、

3. 重复性：板内、形成免疫复合物连接在板上，4000、如此反复作对倍稀释，移至第二管。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上，组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，

(用于血清、向滤纸上印干。OD值为纵坐标，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

2. 洗涤过程很关键。2000、柠檬酸盐、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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